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深圳市芬析儀器制造有限公司
產(chǎn)品展廳
非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR樣品前處理
  • 品牌:深芬儀器
  • 發(fā)布日期: 2019-05-05
  • 更新日期: 2025-03-14
產(chǎn)品詳請(qǐng)
重量 3kg
品牌 深芬儀器
型號(hào) CSY-E96D
測(cè)量范圍 1-100%
加工定制 是
外形尺寸 600*400*300mm

CSY-E96D非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR可定量快速畜牧類(lèi)疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病,非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場(chǎng)、屠宰場(chǎng)、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗(yàn)檢疫單位使用。


非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR技術(shù)參數(shù):

1.波長(zhǎng)范圍:300nm-1000nm

2.波長(zhǎng)準(zhǔn)確度:±2nm

3.吸光度范圍: 0.000~4.000ABS

4.分辨率 :0.001Abs

5.穩(wěn)定性 : ±0.001A/hr

6.透射比重復(fù)性: ≤0.5%T

7.光源 : 進(jìn)口LED

8.樣品池 : 微孔板


非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR樣本前處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。


非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和樣本孔,陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照各50μL;

3.待測(cè)樣本孔加待測(cè)樣本10μL,樣本稀釋液40μL;

4.隨后陰、陽(yáng)性對(duì)照孔和非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR樣本孔中每孔加入辣根過(guò)氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測(cè)抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在非洲豬瘟檢測(cè)儀PCR450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

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