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深圳市芬析儀器制造有限公司
產(chǎn)品展廳
非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟
  • 品牌:深芬儀器
  • 發(fā)布日期: 2019-05-05
  • 更新日期: 2025-12-26
產(chǎn)品詳請
重量 3kg
品牌 深芬儀器
型號 CSY-E96D
測量范圍 1-100%
加工定制 是
外形尺寸 600*400*300mm

非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟檢測前準(zhǔn)備工作:

1.請?zhí)崆?0分鐘從冰箱中取出試劑盒,平衡至室溫。

2.從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象;放置室溫,輕搖均勻,待結(jié)晶完全溶解后再配置洗滌液。非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟可將20ml濃縮洗滌液用蒸餾水或去離子水稀釋配置成400ml工作濃度的洗滌液,未用完的放回4℃

3.20×洗滌緩沖液的稀釋:蒸餾水按1:20稀釋,即1份20×洗滌緩沖液加19份蒸餾水。


非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟實(shí)驗(yàn)所需自備試驗(yàn)器材:

1.檢測儀(450nm)

2.高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL

3.37℃恒溫箱或水浴鍋

4.蒸餾水或去離子水


非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6.非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置陰、陽性對照孔和樣本孔,陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照各50μL;

3.待測樣本孔加待測樣本10μL,樣本稀釋液40μL;

4.隨后陰、陽性對照孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在非洲豬瘟專業(yè)檢測步驟450nm波長處測定各孔的OD值。

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