膠體金快速分析儀的應(yīng)用

發(fā)表時間：2023-10-12

膠體金（colloidal gold），又稱金溶膠（gold solution），是指分散相粒子直徑在l—150nm之間的金溶膠，屬于多相不均勻體系，顏色呈桔紅色到紫紅色。膠體金可以作為標記物用于免疫組織化學(xué)，近10多年來膠體金標記已經(jīng)發(fā)展為一項重要的免疫標記技術(shù)。膠體金免疫分析在藥物檢測、生物醫(yī)學(xué)等許多領(lǐng)域的研究已經(jīng)得到發(fā)展，并越來越受到相關(guān)研究領(lǐng)域的重視。

膠體金的應(yīng)用:

１、膠體金在電鏡水平的應(yīng)用。膠體金應(yīng)用電鏡水平的研究最早，發(fā)展最快，應(yīng)用最廣泛。其最大優(yōu)點是可以通過應(yīng)用不同大小的顆?；蚪Y(jié)合酶標進行雙重或多重標記。直徑為3～15nm 膠體金均可用作電鏡水平的標記物。3～15nm的膠體金多用于單一抗原顆粒的檢測，而直徑15nm多用于檢測量較多的感染細胞。

２、膠體金在光鏡水平的應(yīng)用。膠體金同樣可用做光鏡水平的標記物，取代傳統(tǒng)的熒光素、酶等。各種細胞涂片、切片均可應(yīng)用。主要用于：①用單克窿抗體或抗血清檢測細胞懸液或培養(yǎng)的單層細胞的膜表面抗原。②檢測培養(yǎng)的單層細胞胞內(nèi)抗原，③組織中或亞薄切片中抗原的檢測。膠體金用于光鏡水平的研究，可以彌補其它標記物不可避免的本底過高和內(nèi)部酶活性干擾等缺點。

３、膠體金在流式細胞儀中的應(yīng)用。應(yīng)用熒光素標記的抗體，通過流式細胞儀計數(shù)分析細胞表面抗原，是免疫學(xué)研究中的重要技術(shù)之一。但由于不同熒光素的光譜相互重疊，區(qū)分不同的標記困難，因此必須尋找一種非熒光素標記物，用于流式細胞計數(shù)。這樣可以同時進行幾種標記。該標記物必須能夠改變散射角，膠體金可以明顯地改變紅激光散射角，因而可以作為流式細胞儀的標記物之一。

４、凝集試驗：單分散的免疫金溶膠呈清澈透明的溶液，其顏色隨溶膠顆粒大小而變化，當與相應(yīng)抗原或抗體發(fā)生專一性反應(yīng)后出現(xiàn)凝聚，溶膠顆粒極度增大，光散射隨之發(fā)生變化，顆粒也會沉降，溶液的顏色變淡甚至變成無色，這一原理可定性或定量地應(yīng)用于免疫反應(yīng)。

５、免疫印跡技術(shù)(immunoblotting)：免疫印跡是一種較新的免疫化學(xué)技術(shù)。用聚丙烯酰胺凝膠電泳將蛋白質(zhì)分離，得到的區(qū)帶轉(zhuǎn)移至硝酸纖維素膜，然后用酶免疫法（或免疫熒光、ＲＩＡ）進行定量。免疫膠體金也可用于該法的定量。轉(zhuǎn)移后的硝酸纖維素膜與某特異性的抗體保溫后，再與經(jīng)葡萄球菌Ａ蛋白致敏的膠體金溫育，徹底洗去多余的膠體金，根據(jù)膜上膠體金顆粒顏色深淺可測知樣品中的特異性抗原。

６、膠體金在肉眼水平的應(yīng)用。膠體金取代傳統(tǒng)三大標記物，用于肉眼水平的免疫檢測中。除了膠體金本身具有的特點外，還有以下優(yōu)點：①試劑和樣本用量極小，樣本量可低至1～2ul；②不需γ－計數(shù)器、熒光顯微鏡、酶標檢測儀等貴重儀器，更適于現(xiàn)場應(yīng)用； ③沒有諸如放射性同位素、鄰苯二胺等有害物質(zhì)參與；④實驗結(jié)果可以長期保存；⑤時間大大縮短，提高了檢測速度。金標過程中，無共價鍵形成，是一定離子濃度下的物理吸附。因此幾乎所有的大分子物質(zhì)都可被金標記，標記后大分子物質(zhì)活性不發(fā)生改變。實驗結(jié)果表明，膠體金的敏感性可達到 ELISA的水平。而結(jié)合銀染色時，檢測的敏感性更大大提高。

深芬儀器CSY-JA膠體金快速分析儀應(yīng)用膠體金免疫層析技術(shù)的原理，通過反射光譜法測試CT線強弱程度可檢測PCT、HIV、CRP、NT-proBNP、MYO、CPV、CDV、FPV等免疫層析膠體金法診斷卡條或乳膠條，干式分析法卡條或乳膠條等模塊制成的獸藥殘留、瘦肉精、抗生素殘留、動物疫病、農(nóng)藥殘留、臨床疫病、水質(zhì)安全、轉(zhuǎn)基因等有毒有害物質(zhì)殘留項目。

膠體金快速分析儀檢測項目：
1、獸藥殘留類：克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃西林、呋喃它酮、孔雀石綠、氯霉素、酰胺類、四環(huán)素、喹諾酮、磺胺、黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、三聚氰胺、重金屬鉛、重金屬鎘、重金屬銅、內(nèi)酰胺類、喹乙醇、紅霉素、西地那非、他達拉非、布洛芬、安乃近、西布曲明、糖皮質(zhì)激素、咖啡因、五氯酚鈉、頭孢氨芐、甲硝唑、慶大霉素、青霉素、鏈霉素、甲氧卞胺嘧啶、替米考星、甲砜霉素、賽跟定、己烯雌酚、阿苯達唑、氟苯尼考、地塞米松、甲基睪酮、睪酮、卡那霉素、新霉素、林可霉素、氯丙嗪、氫化可的松、阿維菌素、氧氟沙星、肉類摻假（摻雞肉）、妥布霉素、阿奇霉素、泰樂菌素、安普霉素、頭孢噻呋、克拉霉素、類固醇激素、痢菌凈、組胺、雙氯芬酸鈉、對乙酰氨基酚、吲哚美辛、阿莫西林、替米考新、金剛烷胺等獸藥殘留及抗生素殘留；

2、農(nóng)藥殘留類：菊酯類、百菌清、百草枯、乙草胺、毒死蜱、多菌靈、殺菌劑、甲拌磷、甲草胺、咪鮮胺、無根水、6芐氨基嘌呤、阿維菌素、吡蟲啉、啶蟲脒、多效唑、甲基對硫磷、甲萘威、克百威、腐霉利、甲霜靈、三唑酮、三唑磷、氯蟲苯甲酰胺、滅蠅胺、噻蟲嗪、噻蟲啉、噻蟲胺、噠螨靈、水胺硫磷、聯(lián)苯菊酯、烯酰嗎啉、吡唑醚菌酯、4-氯苯氧乙酸鈉、波爾多液、唑蟲酰胺、氟節(jié)胺、甲基異柳磷、氟蟲氰、嘧霉胺、霜霉威、赤霉素、氟節(jié)胺、腈菌唑、戊唑醇等農(nóng)藥殘留；

3、水產(chǎn)安全類：呋喃唑酮、呋喃妥因、呋喃西林、呋喃它酮、孔雀石綠、氯霉素、五氯酚鈉、磺胺、喹諾酮、頭孢氨芐、酰胺類、四環(huán)素、甲硝唑、慶大霉素、鏈霉素、甲氧卞胺嘧啶、喹乙醇、紅霉素、替米考星、甲砜霉素、賽跟定、己烯雌酚、阿苯達唑、氟苯尼考、地塞米松、甲基睪酮、睪酮、卡那霉素、新霉素、林可霉素、氯丙嗪、氫化可的松、阿維菌素、氧氟沙星、肉類摻假（摻雞肉）、妥布霉素、阿奇霉素、泰樂菌素、安普霉素、頭孢噻呋、克拉霉素、類固醇激素、重金屬銅、重金屬鉛、重金屬鎘、痢菌凈、組胺、雙氯芬酸鈉、對乙酰氨基酚、吲哚美辛、阿莫西林、替米考新、金剛烷胺等獸藥殘留及抗生素殘留；

4、瘦肉精：克倫特羅、沙丁胺醇、萊克多巴胺、苯乙醇胺A等激素殘留類；

5、蜂蜜安全類：氯霉素、喹諾酮、磺胺、青霉素、四環(huán)素、甲硝唑蜂蜜、呋喃唑酮蜂蜜、呋喃它酮、呋喃妥因、呋喃西林等獸藥殘留及抗生素殘留；

6、禽蛋類：喹諾酮、磺胺、青霉素、林可霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氟苯尼考、卡那霉素、金剛烷胺、氯霉素、泰樂菌素、阿莫西林、替米考新、氟蟲氰、氯羥吡啶、安普霉素、痢菌凈、紅霉素等獸藥殘留及抗生素殘留；

7、色素類：赤蘚紅、堿性橙、檸檬黃、日落黃、蘇丹紅、羅丹明B、硫酸銅、酸性橙等

8、奶類：內(nèi)酰胺類、四環(huán)素、多菌靈、氯霉素、金霉素、土霉素、黃曲霉毒素M1、喹諾酮、磺胺、慶大霉素、卡那霉素、羊奶摻假、林可霉素、三聚氰胺、新霉素、大觀霉素、替米考星、紅霉素、鏈霉素、內(nèi)酰胺酶、頭孢氨芐、泰樂菌素、地塞米松、苯甲酸、甲硝唑、頭孢噻呋、阿維菌素、駱駝奶摻假、乳品摻奶精、羊奶蛋白、、吡蟲啉、啶蟲脒、布病、重金屬鉛等獸藥殘留及抗生素殘留；

9、保健化妝品類：氯霉素、甲硝唑、苯二氮卓、磺胺、喹諾酮、林可霉素、己烯雌酚、雌二醇、雌三醇、睪酮、糖皮質(zhì)激素、慶大霉素、西地那非、他達拉非、阿伐拉非、雌酮、苯巴比妥、氯丙嗪、甲基睪酮、氫氯噻嗪、重金屬鉛、重金屬汞、重金屬鎘、四環(huán)素、氟尼辛、西布曲明、羅格列酮、人血白蛋白、咖啡因、甲基安非他命、酚酞、苯海拉明、酮康唑、布洛芬、安乃近、吡羅昔康、孕酮、抗生素三合一、利尿劑、雌激素、三氯生、格列本脲、化妝品中酒精等

10、飼料安全類：磺胺、喹諾酮、內(nèi)酰胺類、林可霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氟苯尼考、卡那霉素、金剛烷胺、氯霉素、三聚氰胺、黃曲霉毒素B1、嘔吐毒素、玉米赤霉烯酮、喹乙醇、T2毒素、伏馬毒素、阿苯達唑、地克珠利、尼卡巴嗪、赭曲霉毒素A、氯羥吡啶等獸藥殘留及抗生素殘留；

11、轉(zhuǎn)基因類：轉(zhuǎn)基因CP4、轉(zhuǎn)基因BT、轉(zhuǎn)基因BAR等轉(zhuǎn)基因；

12、動物疾病類：牛羊結(jié)核、布病、貓瘟、犬細小等動物疾病；

13、其他類：罌粟殼、罌粟堿、喹諾酮、苯甲酸、甜蜜素等有害物質(zhì)；

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