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非洲豬瘟病毒快速診斷儀可快速畜牧類疾病診斷如禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病

發(fā)表時(shí)間:2019-05-14

深圳市芬析儀器制造有限公司針對(duì)非洲豬瘟病毒特研發(fā)了CSY-E96D非洲豬瘟病毒快速診斷儀,該儀器采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法;可定量快速畜牧類疾病診斷如非洲豬瘟、禽流感、豬瘟、豬藍(lán)耳、偽狂犬等疾病,非洲豬瘟病毒快速診斷儀廣泛應(yīng)用于養(yǎng)殖場、屠宰場、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗(yàn)檢疫單位使用。


自從2018年8月以來,非洲豬瘟疫情在我國來勢(shì)洶洶,盡管采取了嚴(yán)厲措施予以防控,但疫情仍在持續(xù)發(fā)酵中。

事實(shí)上,在整個(gè)產(chǎn)業(yè)鏈中,從生豬養(yǎng)殖到餐桌,要切實(shí)防控疫情,涉及到眾多監(jiān)管部門,離不開多方的群策群力,單靠一個(gè)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部是無法解決全程問題的。

根據(jù)農(nóng)業(yè)農(nóng)村部的通報(bào),盡管“我國發(fā)生非洲豬瘟疫情以來,所有已發(fā)疫情均已得到及時(shí)有效處置,目前疫情呈點(diǎn)狀發(fā)生,總體可控”,但也承認(rèn)“非洲豬瘟病毒在我國已形成了一定污染面,傳統(tǒng)的生產(chǎn)、流通、消費(fèi)方式短期內(nèi)難以根本改變,疫情傳播途徑錯(cuò)綜復(fù)雜,風(fēng)險(xiǎn)難以完全阻斷,且目前尚無有效疫苗,以上因素共同決定了防控工作的復(fù)雜性和長期性”。


非洲豬瘟病毒快速診斷儀樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
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4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。


非洲豬瘟病毒快速診斷儀操作步驟:

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔,陰、陽性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照各50μL;

3.待測樣本孔加待測樣本10μL,樣本稀釋液40μL;

4.隨后陰、陽性對(duì)照孔和樣本孔中每孔加入非洲豬瘟病毒快速診斷儀辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗原100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機(jī)洗板)。

6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光水浴鍋孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在非洲豬瘟病毒快速診斷儀450nm波長處測定各孔的OD值。


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